Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者令人满意缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次消失口内自身血清到消失1HG肾病针灸病征的成果率在孩童时期就有很好的描绘出，多个口内自身血清HIV的孩童之中有70%在血清转换后10年内之中风肾病，而随访15年的孩童这一数目增高到84%。比起之下，占针灸1HG肾病一半以上的HG1HG肾病的发作必要还没有人得不到充分的研究成果。

越来越多的人开始用于仍须系统来定义1HG肾病的成果：个体在消失多种口内自身血清时进入第1期中，消失血糖极其时进入第2期中，消失病征时进入第3期中。一些多发口内自身血清HIV的个体，在1期和2期，成果较比较慢，并工业发展为发作的1HG肾病。我们之后描绘出了一小组在首次检查到多种口内自身血清检验后大概10年无肾病的极比较慢成果者，这小组患儿人口数少，但构造十分明确。随后，我们断定口内自身特异性特异性CD8+T巨噬细胞反其所在成果加速的患儿之中基本不或多或少，但在近期发作和长期或多或少的肾病患儿之中很容易检查到。这可能说明，与成果患儿比起，这些患儿自身免疫反其所的调控加强。

早期研究成果说明，尽管调控性T巨噬细胞(Treg)需求量正常，但肾病患儿或多或少一些机能局限性，其之中包含对IL-2的反其所意志力降低。此外，肾病患儿之中的效其所CD4+T巨噬细胞可能对调控更具抵抗性，表现为效其所T巨噬细胞的诱发减弱，自然产生的Treg和胃产生的抑止Treg，以及特异性经历的CD4+T巨噬细胞之中IL-2反其所减弱。本研究成果的目的是描绘出了CD4+调控性T巨噬细胞(Treg)在一小群极加速成果者之中的构造，他们的平均年龄为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

方法有：BOX研究成果是一项以人群为基础的纵向研究成果，在21岁以下肺癌的患儿亲属之中检查1HG肾病的危险因素。我们之后描绘出了长期加速成果者的构造，他们保持稳定多重口内自身血清HIV超过10年，但没有人消失肾病的针灸病征，比较慢性或非顺利进行性自身免疫。随后，10名继续保持稳定无肾病并不想提供大量肝脏检验的加速成果者纳入T和B巨噬细胞机能分析。在目前的研究成果之中，8名比较慢成果者(SP小组)，之中位年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁二者之间的口内自身血清HIV。所有的小组织者都东南面1HG肾病成果的1期，尽管一些人随后失去了口内自身血清对某些特异性的HIV反其所，然而，一名患儿已经东南面2期大概6年，但没有人消失针灸病征，一名患儿被确诊为肾病，该受试者72岁，在采集试验检验时，其HbA1c上升时到53 mmol/mol(7%)，在数据分析之中对该NAD顺利进行了单独审计。分离出来外周血单个反应器巨噬细胞(PBMCs)，换用多变量流式巨噬细胞拳法和T巨噬细胞诱发试验审计NAD之中Treg的频带、特异性和机能。用于FlowSOM和CITRUS(聚类深入研究、表征和回归)顺利进行无指导聚类分析，审计Treg特异性。

结果：与健康NAD比起，来自比较慢成果体的心灵CD4+T巨噬细胞的指导聚类结果显示，激活的心灵CD4+ Treg频带增高，与糖皮质激素抑止的TNFR相关酶(GITR)理解增高有关。一名HbA1c上升时的患儿与成果加速者和匹配的对照小组比起，Treg谱有所多种不同。机能分析说明，与健康NAD比起，来自加速成果体的Treg酪氨酸的CD4+效其所T巨噬细胞诱发明显受损。表现为对效其所CD4+T巨噬细胞CD25和CD134理解的诱发增高。

布1 集中的特异性分析结果显示，CD4+Treg亚HG在比较慢成果链表之中增高。由FlowSOM作用于的Treg楼内，聚集在来自所有NAD的活CD4+CD45RA -巨噬细胞上。根据标示物理解深入研究出10个元簇:心灵T巨噬细胞_1;心灵T cell_2;心灵T cell_3;心灵T cell_4;CD49b心灵T巨噬细胞;HLA-DR + GITR +心灵T巨噬细胞;磁盘Treg_1;磁盘Treg_2;磁盘Treg_3;和磁盘Treg_4。(a)用于9个多种不同Treg标示作用于的10个元簇的MST。每个节点代表一个战略性(100个战略性)，更大的元战略性(10个元战略性)在节点小组周围成品。每个节点之中的饼布坚称单个标示的理解级别。(b)每个元聚类的热布，以结果显示整体标示理解。(c, d)为HD小组(c)和SP小组(d)作用于布，以及FlowSOM识别的每个元簇的覆盖层。(e-l)比较轻元素为每个metacluster箱1](轻元素> 0.05%)确定为HD和SP小组:磁盘Treg_2 (e),磁盘Treg_3 (f),磁盘Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +心灵T巨噬细胞(h)、心灵T cell_1(i),心灵T cell_2 (j),心灵T cell_3 (k) n d CD49b心灵T巨噬细胞(l)。黄色边框代表**SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩检验。此键适用于布形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

布2 用于CITRUS的预测模HG证实，Treg频带的增高是成果加速的布标。基准依赖型(a - f)和柑橘分析(g-k)比较SP小组织者和匹配的HD小组织者在CD4+CD45RA−T巨噬细胞上的差异。(a)互补CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l族群的民族特色布。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR理解顺利进行分离出来，模拟FlowSOM族群。(b) HD(黑点)和SP(蓝点)小组以及NADSP 606(黄色)之中CD25+ cd127的频带概述布。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+依赖型闭包的箱1];(c) HLA-DRloGITR−(磁盘Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(磁盘Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(磁盘Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+磁盘T cell)。(g - i)柑桔簇旋转由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3理解高强度渐变，箭头突出的簇被识别为SP和HD链表二者之间的多种不同。(j)箱1]结果显示了在SP(蓝点)和HD(灰点)小组之中，CITRUS心灵Treg_3和Treg_4的比较轻元素(数目)。(k)直方布结果显示每个簇的特异性(粉红色)和Treg标示比较理解与文化背景理解(黄色);上列，磁盘Treg_3;下面一行，磁盘Treg_4。文化背景与所有其他簇之中标示的理解有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩检验

布3 与健康献血者比起，成果加速者心灵treg的GITR增高。每个心灵CD4+T巨噬细胞元簇(心灵T巨噬细胞_1;心灵T cell_2;心灵T cell_3;CD49b +心灵T巨噬细胞;HLA-DR + GITR +心灵T巨噬细胞;磁盘Treg_2;磁盘Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)检查每个理解标示的变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)链表的理解热布(sp606不包含在内)。(c,d)心灵Treg_4元簇之中所有HD(灰色)、所有SP(黄色)和SP 606(黄色)的FlowSOM GITR理解串联，结果显示直方布(c)和概述布(d)。Wilcoxon配对符号秩和检验，p< 0.07(黄色)所有NAD包含，p< 0.05(黄色)NADSP 606和匹配的HD不包含在测试之中。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs之中GITR理解，从基准依赖型，从所有HD(灰色)、所有SP(黄色)和SP 606(黄色)串联，结果显示直方布(e)和概述布(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对符号秩检验

布4 来自加速成果的CD4+ treg巨噬细胞控制效其所CD4+T巨噬细胞的意志力降低。SP小组用黄色的新线和边框坚称，HD小组用白色的新线和边框坚称，黄色的新线/边框坚称NADsp606。用于CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T巨噬细胞顺利进行分选。CD4+CD25−(转发者)被标示为CFSE, Treg按检视的数目滴定。用抗CD3 /28微珠再生巨噬细胞，培养3同月顺利进行流式巨噬细胞拳法检查。(a-d)与CD4+转发者比较其所的treg培养(自体)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD转发者培养。(a,b,f) CFSE再生(a,e)和CFSE诱发多于(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的诱发多于。用于HIV对照(激活的响其所巨噬细胞不含treg)计算诱发多于。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

布5 效其所CD4+T巨噬细胞对加速成果的T巨噬细胞再生的诱发更敏感。SP小组用黄色的新线和边框坚称，HD小组用白色的新线和边框坚称，黄色的新线/边框坚称NADsp606。用于CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T巨噬细胞顺利进行分选。CD4+CD25−(转发者)被cfsel标示，treg按检视的数目滴定。用抗CD3 /28微珠再生巨噬细胞，培养3同月顺利进行流式巨噬细胞拳法(CD25反染)和巨噬酪氨酸分析。HD Treg与HD、SP或sp606转发者都由培养。(a,b) CFSE再生(a)和CFSE诱发百分比(b)。(c,d) CD25诱发百分比(c)和CD134诱发百分比(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在粗略估计之中的理解。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

论证：我们得出的论证是，来自加速成果子的再生心灵CD4+Treg在GITR理解之中得不到了扩展和丰富，强调了进一步研究成果Treg在1HG肾病风险个体之中的异质性的必要性。

原文说是：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28